超声波细胞破碎仪厂家介绍常见的细胞破碎法

　　超声波细胞破碎仪厂家介绍常见的细胞破碎的方法有：

　　(一)物理破碎法，指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。

　　1.用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器)。

　　机制：可能与强声波作用溶液时，气泡产生、长大和破碎的空化现象有关，空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。

　　超声波细胞破碎仪的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。

　　2.高压破碎：细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上，被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化，从而破碎释放内含物。

　　这是一种温和的、*破碎细胞的较理想的方法。

　　3.反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。

　　(二)化学破碎法，指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变 。

　　有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠(SDS)、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。

　　(三)机械破碎法，是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器 等将细胞破碎开来。

　　1. 高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至zui慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。

　　2. 玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。

　　(四)酶学破碎法，选用合适的酶，使细胞壁遭到破坏，进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。

　　细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好。

　　裂解液标准配方：50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 。

　　无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或减慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，而且应该在破碎的同时多加几次。

　　以上是细胞破碎的常见方法，更多相关问题，咨询超声波细胞破碎仪厂家。